Presencia de ADN bacteriano en el tejido valvular de pacientes con cardiopatía reumática crónica / Presence of bacterial DNA in valvular tissue of patients with rheumatic heart disease

Background: Rheumatic heart disease (RHD) is a delayed consequence of a pharyngeal infection with Group A streptococcus (GAS), usually ascribed to a cross-reactive immune response to the host cardiac tissues. Acute rheumatic fever (ARF) and its ensuing valvular sequelae are thus considered the prototype of a post-infectious autoimmune disease, with no direct evidence of residual streptococcal antigen in diseased valvular tissues. However, recent studies concerning the antigenic specificity and clonality of intralesional lymphocytes have revealed oligoclonal expansions characteristic of an antigen specific response, that might be related to GAS. Aim: To search for bacterial DNA in valvular tissue from RHD patients and controls. Material and methods: We extracted DNA from surgically excised valve specimens from 15 RHD patients and 6 non RHD controls and tested for the presence of bacterial DNA by Polymerase Chain Reaction (PCR) with primers for 16S rRNA. Results: Eighty percent (12/15) of valve specimens from RHD patients were positive for bacterial DNA, as opposed to none of the valves (n =6) from non RHD controls. Conclusions: These results suggest that GAS might persist in valvular tissue in patients with ARF and contribute to the inflammatory scarring lesion that leads to cardiovascular sequelae.

Determinación de estallido respiratorio en sangre total mediante la técnica de citometría de flujo / Determination of respiratory burst in total blood by means of flow cytometry technique

La capacidad de defensa de las células fagocíticas depende del llamado estallido respiratorio, el cual se caracteriza por una serie de reacciones generadas por la NADPH oxidasa, que lleva a la liberación de especies reactivas de oxígeno, letales para el microorganismo. El propósito de este estudio fue desarrollar un método simple para la evaluación cuantitativa del estallido respiratorio mediante Citometría de flujo para poder utilizarlo como estrategia diagnóstica en individuos con alteración inmunológicas u otras patologías clínicas. La estandarización se realizó con estudios de dosis-respuesta y tiempo-respuesta, tanto del activador forbol 12-miristato-13acetato (PMA) así como del fluorocromo 123-dihidrorodamina (DHR). Se analizaron 30 muestras de individuos normales provenientes de un banco de sangre para obtener los valores de referencia, los cuales fueron definidos como los valores de estallido respiratorio neto expresado en porcentaje de fluorescencia y que fluctuaron entre 85,3 y 95,0 con una desviación estándar de 2,4; y los expresados en intensidad media de fluorescencia (MFI), que fluctuaron entre 13,3 y 50,4 con una desviación estándar de 9,3. De esta forma, los valores se caracterizaron como aquellos iguales al promedio ± 2 desviaciones estándar, cubriéndose el 96,6 por ciento de la muestra. En conclusión, esta nueva forma de determinar el estallido respiratorio, ofrece la gran ventaja de visualizar directamente las células, dando la oportunidad de medir en forma simultánea tanto porcentaje como la intensidad media de fluorescencia celular, permitiendo obtener así resultados más exactos y precisos.